Die Kirche Santo Sefano zählt zu den wichtigsten Beispielen der venezianischen Spätgotik. Die Fassade mit ihrem schönen Portal aus der Werkstatt von Bartolomeo Bon (15. Jahrhundert) kann kaum bewundert werden, da sie auf eine enge Gasse ausgerichtet ist.
Die Kirche war 1374 vollendet und ihr Innenraum zeigt die typischen Merkmale jener Zeit; drei breite Schiffe, getrennt durch weite Spitzbogenarkaden. Aus dem frühen 15. Jahrhundert stammen hingegen die polygonale Apsis, die Holzdecke in Form eines umgedrehten Schiffes und die Dekoration der Ziegelwände. Einen Kontrast zu diesem mittelalterlichen Ensemble bilden die barocken Altäre.
In der Sakristei bedeutete Werke aus der Renaissance: von Jacopo Tintoretto sind ein Letztes Abendmahl, eine Fusswaschung und Garten Gethsemane, von Bartolomeo Vivarini ein Polyptichon, von Paris Bordone eine Taufe Christi und Bonifacio de Pitati wird eine Madonna mit Heiligen zugeschrieben. Santo Stefano ist auch die letzte Ruhestätte des Dogen Francesco Morosini, Eroberer des Peloponnes (1694).